在臨床檢驗中，EDTA二鉀作為常用的抗凝劑，廣泛應用于全血細胞計數、血型鑒定等檢測項目。其通過與血液中的鈣離子結合，形成穩定的螯合物，阻止凝血反應，從而維持血液樣本的液態狀態。但在實際應用中，采血管內的EDTA二鉀可能因多種因素影響而失去抗凝效果，導致血液凝固，影響檢測結果。

一、EDTA二鉀的抗凝原理與穩定性基礎 
EDTA二鉀（乙二胺四乙酸二鉀）的抗凝作用基于其分子結構中的氨基和羧基基團，能與鈣離子（Ca2?）形成1:1的穩定螯合物，使血液中游離鈣離子濃度顯著降低，凝血酶原無法轉化為凝血酶，從而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，達到抗凝目的。在干燥狀態下，EDTA二鉀具有較好的化學穩定性，常溫下可長期保存而不發生結構降解。

采血管生產過程中，通常將EDTA二鉀配制成溶液均勻噴涂于管內壁，經干燥后形成穩定的抗凝涂層。當血液注入采血管后，EDTA二鉀迅速溶解并與鈣離子結合，一般情況下，每毫升血液中加入1.5-2.2mg EDTA二鉀即可實現有效抗凝。

二、導致EDTA二鉀失效的常見因素
1、儲存條件不當：EDTA二鉀的穩定性受溫度、濕度影響較大。若采血管長期暴露在高溫環境中，可能導致抗凝劑結晶風化，失去與鈣離子結合的活性。
2、抗凝劑濃度不足或涂布不均：采血管生產過程中，若抗凝劑噴涂量未達標準（如每管EDTA二鉀含量低于1.2mg），可能導致抗凝能力不足。當采集的血液樣本量超過采血管額定容量，會使EDTA二鉀與血液的比例失衡，無法完全螯合鈣離子，進而引發凝血。此外，抗凝劑涂布不均也是常見問題。若管內壁涂層存在空白區域，血液接觸該區域時因缺乏EDTA二鉀，易發生局部凝固，形成肉眼難以察覺的小凝塊，尤其在樣本運輸或離心過程中可能堵塞檢測儀器管路。 

3、血液樣本采集與處理不當：采血操作不規范可能間接導致EDTA二鉀失效。若采血管未充分混勻（一般需顛倒8-10次），EDTA二鉀無法與血液充分接觸，也會導致抗凝不完全。此外樣本處理延遲同樣存在風險。采集后的血液樣本若在室溫下放置超過2小時，即使EDTA二鉀濃度正常，也可能因細胞代謝釋放鈣離子，或血小板活化釋放凝血因子，引發緩慢凝血。尤其在夏季高溫環境中，這種現象更為明顯。 

三、EDTA二鉀失效的判斷與影響
1、失效的直觀與實驗室判斷：肉眼觀察可見血液樣本中出現絮狀沉淀、凝塊或纖維絲，EDTA二鉀可能失效。離心后血清與血細胞界面出現膠凍狀物質，或血細胞層上方有血凝塊，均為抗凝失敗的典型表現。
2、對檢測結果的具體影響：EDTA二鉀失效導致的血液凝固，會對多項檢測結果產生干擾。在血常規檢測中，血凝塊會被儀器誤判為白細胞或血小板，導致計數偏高；紅細胞因聚集會使平均紅細胞體積（MCV）、紅細胞分布寬度（RDW）等參數失真。此外，凝固的血液樣本無法用于分子生物學檢測（如PCR），因細胞破裂釋放的核酸酶會降解目標核酸。 
EDTA二鉀抗凝劑在特定條件下確實存在失效風險，其失效與儲存環境、生產質量、操作規范密切相關。通過加強采血管儲存管理、優化生產工藝、規范采血與樣本處理流程，可顯著降低失效概率。實驗室工作人員應提高對EDTA二鉀失效的識別能力，及時發現并處理抗凝失敗的樣本，以保障檢驗結果。

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