在吖啶酯化學發光免疫中,通常是將吖啶酯作為指示物來標記抗體,但其實吖啶酯也是可以標記抗原的,那么吖啶酯標記抗原和標記抗體有什么區別呢?
吖啶酯標記抗原和標記抗體在標記原理以及最終的光檢測上都是相似的,區別主要是在免疫分析測定法的不同。通常吖啶酯標記抗體是用于雙抗體夾心法測定,而吖啶酯標記抗原是用于競爭法測定。
化學發光試劑吖啶酯標記抗體
雙抗夾心法:
雙抗夾心法通常是檢測抗原,免疫組分有三種:固相抗體(特異性抗體與固相載體結合),受檢樣本(即需要被檢測的抗原),用吖啶酯進行標記的抗體。這三種會形成兩種抗體夾著抗原的免疫復合物,該復合物中的抗體由于被吖啶酯標記,可以通過吖啶酯的化學發光反應分析含量,從而計算待測樣本中抗原含量。
有時也可以加入二抗(第二抗體,抗體的抗體,作為抗原與抗體結合不與抗原結合)作為固相載體,一抗固定于測試線T線,二抗作為對照線C線(質控線),這樣德晟吖啶酯標記抗體過量時會繼續與二抗結合,通過測試線和對照線中吖啶酯發光強度比值來分析計算待測抗原的濃度。
舉例:艾滋病的抗原HIV-1p24檢測就是采用的雙抗夾心法,不使用吖啶酯標記抗原,而是標記抗p24抗體。
競爭法:
競爭法可用于測定抗原,也可用于測定抗體。比如說檢測抗原,可以將待測抗原和吖啶酯標記的抗原以競爭形式與固相抗體結合,這兩種抗原以同樣的機會與固相抗體結合,因此結合于固相的吖啶酯標記抗原的量與受檢抗原的量呈反比。德晟吖啶酯標記的抗原抗體復合物可通過化學發光測得,根據反比關系可計算待測抗原含量。
可以看出同樣是檢測抗原,一個是用吖啶酯標記抗體,一個是吖啶酯標記抗原,測定方法不一樣標記的對象不一樣,對于抗體檢測也是類似的,不是檢測什么就標記什么。德晟目前提供的有六種吖啶酯,可滿足多種不同抗原、抗體的標記和檢測。