目前國內的化學發(fā)光免疫分析技術已突飛猛進,逐步與國際發(fā)達國家水平接軌,其中化學發(fā)光試劑主要圍繞吖啶酯類發(fā)光試劑和魯米諾類試劑展開,那么誰將成為的核心C位呢?
吖啶酯化學發(fā)光試劑
魯米諾與吖啶酯的區(qū)別:
吖啶酯類和魯米諾都是化學發(fā)光免疫檢測分析CLIA中應用非常廣泛的發(fā)光試劑,兩者有很大的區(qū)別,吖啶酯與魯米諾相比,最直觀的是靈敏度要高很多。
吖啶酯的價格遠高于魯米諾,吖啶酯類發(fā)光試劑的價格通常以毫克或克計價,平均每毫克幾百元;而魯米諾則是以克或千克計價,克價在幾十到上百不等,所以說價差還是比較大的。
魯米諾、異魯米諾及其衍生物是最早使用的一類化學發(fā)光物質,需要使用催化劑過氧化物酶POD及增強劑,這將導致背景發(fā)光增強,使測量本底升高,從而限制了這一技術的靈敏度和它的應用及發(fā)展。
吖啶酯的發(fā)光效率高,且發(fā)光體系簡單,不需要加入催化劑,本底低,標記簡單。由于傳統(tǒng)吖啶酯AE-NHS的熱穩(wěn)定性不是很好,此后又相繼研究合成了較AE-NHS更穩(wěn)定的吖啶酯衍生物并應用于CLIA。例如DMAE-NHS被證明具有良好的熱穩(wěn)定性和發(fā)光性能。
吖啶類發(fā)光試劑反應靈敏度非常高,激發(fā)液的加入導致反應體系立即釋放約430nm的光子,通過使用標準光度計(luminometer)計數光子數量就可檢測蛋白質的濃度。因為此發(fā)光過程是十分短暫(整個過程在2秒鐘內完成),樣品必須直接放在光度計內部光子探測器前面。蛋白質、多肽、抗體、核酸都可以用吖啶酯標記。標記化合物在堿性過氧化氫的激發(fā)下快速發(fā)光,通過收集光子可以檢測到標記化合物。
吖啶酯在CLIA中各方面性能顯然是優(yōu)于魯米諾的,不過它的價格和需要的設備成本更高一些, 在一些檢測要求相對低一點的情況是不需要用吖啶酯的。吖啶酯和魯米諾這兩類試劑德晟都有研發(fā)提供,可以滿足不同的檢測需求。