一、吖啶酯直接化學發光的原理與優勢
1、發光原理:吖啶酯是一類可用作化學發光標記物的化學物質。在堿性過氧化氫(H?O?)溶液中,吖啶酯分子受到過氧化氫離子進攻,其吖啶環上的取代基能與吖啶環上的 C - 9 和 H?O?形成不穩定的二氧乙烷。此二氧乙烷迅速分解為二氧化碳(CO?)和電子激發態的 N - 甲基吖啶酮,當 N - 甲基吖啶酮回到基態時,便會在430nm 處釋放光子,從而產生化學發光現象。從發光機理來看,在形成電子激發態中間體之前,聯結于吖啶環上的不發光的取代基部分從吖啶環上脫離開來,即未發光部分與發光部分分離,這使得其發光效率基本不受取代基結構的影響。2、顯著優勢展現:吖啶酯直接化學發光具有諸多突出優勢。背景發光低,信噪比高,這意味著檢測結果更加清晰準確,能夠有效減少假陽性和假陰性結果的出現。發光反應干擾因素少,在有 H?O?的稀堿性溶液中即可發光,無需額外的催化劑,大大簡化了檢測體系。光釋放快速集中,加入發光啟動試劑后 0.4s 左右發射光強度達到最大,半衰期為 0.9s 左右,2s 內發光基本結束,可實現快速檢測,滿足臨床快速診斷的需求。發光效率高、發光強度大,吖啶酯具有較高的量子產率,其化學發光效率通常是魯米諾的五倍或五倍以上,能夠檢測出極微量的目標物質,提高檢測的靈敏度。吖啶酯易于與蛋白質聯結,且聯結后光子產率不減少,同時標記物在 2 - 8℃下可保存數月之久,穩定性良好,有利于試劑的儲存和運輸。
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