在化學實驗和生物研究領域,緩沖液能夠維持溶液的酸堿度穩定,為各種化學反應和生物過程提供適宜的環境。Bis-Tris 緩沖液作為一種常用的緩沖劑,它是 Bis(2-羥乙基)胺緩沖液家族的成員,在一定的壓力變化、凝膠電泳實驗、陰離子交換色譜法和 NMR 等實驗條件下,能有效抵抗 pH 的變化,保持溶液酸堿度的相對穩定。其 pH 范圍為 5.8 -7.2,適用于許多生物化學和分子生物學實驗。 那它該如何制備呢?一起來看看。
一、Bis-Tris 緩沖液應用領域
1、凝膠電泳實驗:在凝膠電泳中,Bis-Tris 緩沖液可以為核酸或蛋白質的分離提供穩定的 pH 環境,確保實驗結果的準確性。
2、陰離子交換色譜法:用于分離和純化帶有負電荷的生物分子,如蛋白質、核酸等,維持色譜過程中的 pH 穩定。
3、NMR(核磁共振):在核磁共振實驗中,Bis-Tris 緩沖液可以幫助維持樣品的酸堿度,確保 NMR 信號的穩定性和可重復性。
二、制備 Bis-Tris 緩沖液的材料與設備
1、材料
(1)Bis-Tris:純度較高的 Bis-Tris 粉末是制備緩沖液的關鍵原料。
(2)去離子水(dH2O):用于溶解 Bis-Tris 和調節溶液體積。
(3)濃鹽酸:用于調節緩沖液的 pH 值至所需范圍。
2、設備
(1)分析天平:準確稱量 Bis-Tris 的質量。
(2)容量瓶:用于配制一定體積的緩沖液。
(3)攪拌器:使 Bis-Tris 充分溶解于去離子水中。
(4)pH 計:測量溶液的 pH 值,以確保準確調節至所需范圍。
(5)過濾器或高壓釜:用于對緩沖液進行滅菌處理。
三、Bis-Tris 緩沖液的制備步驟
1、稱量 Bis-Tris:使用分析天平準確稱取 209.24 g 的 Bis-Tris 粉末。確保稱量的準確性對于制備濃度準確的緩沖液很重要。
2、溶解 Bis-Tris:將稱取好的 Bis-Tris 粉末緩慢加入到裝有 750 mL 去離子水的容器中。可以使用攪拌器攪拌,加速 Bis-Tris 的溶解過程,確保粉末充分溶解,形成均勻的溶液。
3、調節pH 值:使用濃鹽酸調節溶液的 pH 值至所需范圍。這一步需要小心操作,逐滴加入濃鹽酸,并不斷用 pH 計監測溶液的 pH 值變化。在調節 pH 值的過程中,要注意避免加入過多的鹽酸,以免導致 pH 值過低。同時,要充分攪拌溶液,使鹽酸與 Bis-Tris 溶液充分混合,確保 pH 值的均勻性。
4、定容至 1L :當溶液的 pH 值達到所需范圍后,用去離子水將溶液定容至 1L。可以使用容量瓶進行準確的定容操作,確保緩沖液的濃度準確。
5、滅菌處理:對制備好的 Bis-Tris 緩沖液進行滅菌處理。可以選擇使用過濾器過濾或高壓釜滅菌的方法。
6、過濾器過濾:使用合適孔徑的過濾器對緩沖液進行過濾,去除可能存在的細菌和雜質。
7、高壓釜滅菌:將緩沖液裝入合適的容器中,放入高壓釜中進行滅菌處理。按照高壓釜的操作說明設置合適的溫度和時間,確保滅菌效果。 8、存儲緩沖液:將滅菌后的 Bis-Tris 緩沖液存儲在 4 攝氏度的環境中。低溫存儲可以延長緩沖液的保質期,防止細菌生長和溶液變質。
Bis-Tris 緩沖液在化學實驗和生物研究中具有重要的應用。通過準確稱量材料、溶解、調節 pH 值、定容、滅菌和存儲等步驟,可以制備出高質量的 Bis-Tris 緩沖液。在制備過程中,要注意材料的純度、準確稱量、pH 值調節、滅菌處理和存儲條件等因素,才能充分確保緩沖液的性能和穩定性。湖北新德晟材料科技有限公司作為Bis-Tris 緩沖劑原料生產廠家,供應系列齊全,定制和批量采購都可以滿足,出口價格便宜,產品性能好,客戶好評多。如果您有采購意向,歡迎隨時點擊網站咨詢購買!
