吖啶酯標(biāo)記蛋白效率計(jì)算方法

1，取100μL 待測(cè)樣品，稀釋至Abs280在0.1~1.5之間；

2，向1中加入少量鹽酸，調(diào)整至pH=1~2，使其形成具有黃色特征的鹽溶液，吸收峰在367nm；

3，分別測(cè)試待測(cè)樣品的Abs280nm 和Abs367nm ；

4，Equation1: 吖啶酯濃度(mol/L)=Abs367/14650 ；

5，校正蛋白Abs280數(shù)值；

Equation2: Abs280(校正后) = Abs280- (Abs367×0.17);

6，準(zhǔn)備1mg/mL未標(biāo)記的蛋白溶液（e.g. 50ug 蛋白加入50μL 標(biāo)記緩沖液），取出10μL 并補(bǔ)加490μL ddH2O (稀釋50倍)。讀取Abs280nm ，并乘以稀釋倍數(shù)。

7，計(jì)算蛋白質(zhì)量濃度：

8，計(jì)算F/P摩爾比