在生物實驗中會經常被用到，它們種類繁多，可能你需要的緩沖劑和你選的緩沖劑表面符合，實際使用時就存在一定的差異，所以選好合適的緩沖劑是很有必要的；同時，不同緩沖液差別也很大。德晟帶你來聊聊Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的之間的區別。 

Tris-HCl緩沖液

是在生物化學研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍，Tris-HCl緩沖液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸鹽緩沖液：pH＝5.0～9.0。

優點                  

1、 Tris-HCl緩沖液穩定，與生理體液的相容性好（Tris-HCl與鈣、鎂離子不會形成沉淀；相反，磷酸鹽與鈣、鎂離子會產生沉淀）；

2、而且相同PH，相同濃度的Tris-HCl緩沖液的離子強度低，這對酶類測定尤為重要，因為大離子強度易致有些酶失活。因此，有時用Tris-HCl代替磷酸鹽緩沖液，效果更好。

Tris-HCl緩沖液缺點：

1、溫度效應大，如4℃時pH=8.4，37℃時pH=7.4

2、pH值受溶液濃度影響較大，稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；

3、對某些pH電極發生一定的干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。

4、易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴密封。 

HEPES緩沖液

HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。

優點：

pKa值介于6.0和8.0之間；

在水中具有高溶解度；

具有膜不透性，不易穿透生物膜；

對生化反應影響有限，可耐化學和酶解作用，且不與金屬離子生成復合物或沉淀；

有極低的可見光和紫外光吸收；

離子濃度、溶液組成和溫度對解離的影響小;

HEPES緩沖液缺點：

如果將HEPES水溶液暴露于環境光下三小時，會產生細胞毒性的H2O2；

HEPES水溶液必須遠離光線以免影響實驗結果；

而配置成溶劑后，要在4℃下保存，建議在短期內使用效果更佳；

HEPES粉末放置的時候一般放于干燥的室內，不能直接長時間照射陽光。