許多生物學實驗都需要使用生物緩沖液來維持有效的pH值,這很重要,因為蛋白質和酶對pH的變化敏感,因此為當前和下游實驗選擇正確的至關重要。在本文中,將簡要討論選擇生物緩沖液時要考慮的一些重要因素,然后討論如何準備生命科學中常用的緩沖液。如下表所示,Tris、HEPES、PIPES等生物緩沖液的pH緩沖范圍數據。
生物緩沖液pH緩沖范圍
Bis-Tris:5.8-7.2
HEPES:6.8-8.2
PIPES:6.1-7.5
Tris/Tris-HCL:7.0-9.0
選擇緩沖區時,重要的是要考慮每個緩沖區的優缺點。首先,您計劃在實驗中使用的試劑的pH范圍必須與您選擇的緩沖液的pH范圍一致。您可以通過查看緩沖液的pH范圍或將緩沖液的pKa與要保持實驗的pH值進行實際比較來確定它們是否重合。pKa值應在所需pH值的一個單位內。
此外,您必須考慮濃度,生物緩沖液毒性,溫度和反應性。生物緩沖液的濃度必須足以說明您計劃在實驗中使用的酸或堿的量。您計劃使用的pH改變成分越多,所需的生物緩沖液濃度就越高。生物緩沖液毒性非常重要,因為某些緩沖液可能會對正在使用的細胞產生毒性,因此,如果不確定毒性,可以在實驗中使用生物緩沖液之前先對細胞進行測試。還應確保決定使用的生物緩沖液不會在實驗中產生不需要的反應。
如今,生物緩沖液的型號種類越來越多,并且應用領域也越來越廣。導致市場上的生物緩沖液長期處于供不應求的情況,特別是Tris緩沖液長期處于有價無市的處境。在這里推薦一家公司,湖北新德晟材料有限公司。
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