是膽固醇降解代謝過程中的關鍵酶。它依賴于輔酶 FAD，能催化膽固醇氧化和異構化生成膽甾-4-烯-3-酮，同時產生H2O2。近些年來，膽固醇氧化酶在不同領域都發揮著它的價值。我帶大家了解的是關于膽固醇氧化酶在臨床檢測中的一些用途。

膽固醇氧化酶可以用來檢測多種樣品中的膽固醇含量：

1. 全血清和其血清；

2. 低密度脂蛋白和高密度脂蛋白；

3. 紅細胞膜、其他細胞膜；

4. 膽結石和人體膽汁。

1973 年，Richmond 發現可以通過測定諾卡氏菌中的膽固醇氧化酶催化膽固醇氧化生成的H2O2的量來測定血清中膽固醇水平。H2O2可以與四價鈦和二甲酚橙反應生成在550 nm有吸收的有色物質。后來又通過測定膽固醇氧化酶作用下生成的膽甾-4-烯-3-酮（在 240 nm 有最大吸收）的量測定血清膽固醇。

由于人體血漿中70%的膽固醇是以酯化的形式存在的，膽固醇酯酶也被應用到血漿總膽固醇的測定中。膽固醇酯酶水解膽固醇酯生成游離膽固醇；膽固醇氧化酶作用于膽固醇生成膽甾酮和過氧化氫;在辣根過氧化物酶的作用下，過氧化氫能將 4-氨基-安替比林和苯酚轉化為紅色的亞醌類化合物，該化合物在500 nm處有最大吸收峰，通過檢測紫外吸收強度就能夠測定膽固醇的含量。這個方法具有簡單、干擾少、重現性好的優點，通常將膽固醇氧化酶、膽固醇酯酶和過氧化氫酶混合在一起，制成測量血清總膽固醇含量的診斷試劑盒，用于臨床檢驗中。但是，由于色素的干擾，膽汁中的膽固醇不能用此比色法檢測，而要通過電化學方法測定膽固醇氧化所消耗的氧氣量。

為了提高膽固醇利用率和穩定性，常將膽固醇固定化，制成傳感器的形式。通過測定氫敏染料的熒光度變化檢測膽固醇水平。這個方法的分析范圍在0.2-3 mM，在7-12 min 能夠得到穩定信號。

之后，又制作了一個基于氧氣的電化學還原的生物傳感器，它采用了雙層鍍膜的方式，將膽固醇氧化酶固定于尼龍網上，置于氧探頭膜之上或者過氧化氫檢測器的醋酸纖維素膜之上，上方再覆蓋一層聚碳酸脂膜。在流動注射系統中，在0.5-5 mM 的膽固醇濃度范圍內，這個檢測器能夠迅速給出準確、重現性好的結果，且不會受有機干擾的影響。